囯产精品久久久久久久久免费蜜桃,拔萝卜未删减版hd,狼群影院www,國產麻豆av愛豆mad

免費(fèi)咨詢熱線:
技術(shù)文章
首頁 > 技術(shù)中心 > RNA提取的原理是什么?

RNA提取的原理是什么?

 更新時間:2023-09-18 點(diǎn)擊量:2148

不同組織RNA提取原理是將細(xì)胞裂解,釋放出 RNA,并通過不同方式去除蛋白,DNA 等雜質(zhì),最終獲得高純度 RNA 產(chǎn)物的過程。常用的RNA提取方法是Trizol方法,Trizol內(nèi)含異硫氰酸胍能迅速破碎細(xì)胞,同時使核蛋白復(fù)合體中的蛋白變性并釋放出核酸,由于釋放出的DNA和RNA在特定pH值下的溶解度不同,且分別位于中間相和水相,從而使DNA和RNA得到分離,取出水相后,通過有機(jī)溶劑 (氯仿) 抽提及異丙醇沉淀,可得到純凈RNA。那么你知道RNA提取的原理是什么嗎?讓我們一起來看看吧!

一、常見RNA提取樣本細(xì)胞裂解方法

1.異硫氰酸胍/苯酚(Trizol)

原理:苯酚裂解細(xì)胞,變性蛋白,但不能wan全抑制RNase活性。異硫氰酸胍迅速溶解蛋白,破碎細(xì)胞,解離核蛋白復(fù)合體,釋放核酸,并抑制RNase活性,保持RNA完整性。苯酚是酸性酚,后續(xù)加入氯仿進(jìn)行有機(jī)萃取。

特點(diǎn):得率高、可提取到含miRNA和其他小RNA在內(nèi)的總RNA。但產(chǎn)生有機(jī)試劑廢物。

適用范圍:次級代謝較少的植物組織,如幼苗、幼葉等。培養(yǎng)細(xì)胞、動物組織、微生物。

2.胍鹽/β-巰基乙醇法:

原理:胍鹽一般是鹽酸胍或異硫氰酸胍。鹽酸胍迅速裂解細(xì)胞,變性蛋白,并抑制核酸酶活性。配合β-巰基乙醇還原蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)中的二硫鍵,從而使RNase變性。

特點(diǎn):得率高

適用范圍:次級代謝較少的植物組織,如幼苗、幼葉等。培養(yǎng)細(xì)胞、動物組織、微生物。

二、常見抽提方法:

1.酚氯仿抽提(有機(jī)試劑抽提)

原理:將被裂解的生物樣本,混勻離心分相以后,RNA在上層水相,DNA,蛋白質(zhì)在中間層,下層有機(jī)相。收集水相加入乙醇或異丙醇可沉淀RNA,漂洗后得到RNA。

優(yōu)點(diǎn):得率高、可提取到含miRNA和其他小RNA在內(nèi)的總RNA。

缺點(diǎn):用到苯酚、氯仿等有毒試劑。

2.硅膠柱法抽提

原理:硅基質(zhì)材料在一定的高鹽緩沖系統(tǒng)下高效、專一地吸附核酸。(高鹽低pH吸附核酸,低鹽高pH釋放核酸。

優(yōu)點(diǎn):操作簡單、安全無毒

缺點(diǎn):需配合高速離心機(jī)使用;提取的總RNA不含小于200nt的小RNA。

3. 磁珠法抽提

原理:納米微球磁珠材料表面涂上一層二氧化硅,使磁珠獲得吸附能力。

優(yōu)點(diǎn):磁場中快速分離,無需離心,可實(shí)現(xiàn)自動化操作。

缺點(diǎn):成本較高;提取的RNA可能殘存磁珠。

更多有關(guān)RNA提取的原理問題,請聯(lián)系北京百奧創(chuàng)新科技有限公司:



国产精品久久久久久久久久妞妞| 双性人妖互交videos| 特级小箩利无码毛片| 无人区乱码一区二区三区| 国产女人高潮视频在线观看| 农村熟女xxxxhd做受| 天天影视色香欲综合久久| 苍井空亚洲精品aa片在线播放| 被群cao的合不拢腿h小说| 国内女人喷潮完整视频| 国产精品av| 国产又黄又爽又色的免费| 国产农妇精品xxx| 国产成人亚洲精品狼色在线| 亚洲成av人片在线观看无| 女友躲雨被老头玩弄| 日本激情公妇厨房嗯嗯| 两个人看的www高清免费中文| 国产乱码精品一区二区三区久久| 中文乱码人妻系列一区二区| 久久人人97超碰A片精品| 19岁女RAPPER潮水欢迎你| 少妇高潮一区二区三区99 | 黑人女人性较视频免费视频| 亚洲综合AV一区二区三区不卡| 张柏芝用嘴给陈冠希高潮| 精品久久久久久无码人妻中文| 无码人妻一区二区三区免费手机| 成人毛片100免费观看| 久久久久久精品免费a片| 亚洲色噜噜狠狠站欲八| 人体张悠雨全身光一丝不| 无套内谢孕妇毛片免费看| 中国极品美軳人人体bt| 美少年高潮h跪趴扩张调教喷水| 51精品国产人成在线观看 | 我朋友的妻子2018| 国语自产偷拍精品视频偷| 欧美 丝袜 自拍 制服 另类| 亚洲人成精品久久久久| 亚洲av无码码潮喷在线观看|